美國 3M ATP 熒光檢測儀 LM1 樣品采集與拭子使用規范操作手冊
上海儀器網 / 2025-09-17
美國 3M ATP 熒光檢測儀 LM1 通過檢測生物組織中的 ATP 含量(以 RLU 值,即相對光單位表示),快速判斷表面潔凈度,廣泛應用于食品加工、醫療、餐飲等領域。其檢測結果的準確性高度依賴 “樣品采集的代表性” 與 “拭子操作的規范性”,若存在拭子選擇不當、采樣手法錯誤等問題,易導致 RLU 值偏差,出現 “假陰性”(漏檢污染)或 “假陽性”(誤判污染)。本手冊針對樣品采集與拭子使用的全流程,明確操作規范與關鍵控制點。?
一、操作前準備?
(一)人員與環境準備?
- 人員防護:操作人員需穿戴一次性無菌手套(無粉型,避免手套粉末中的 ATP 干擾檢測)、口罩,若采樣對象為食品接觸表面(如烘焙烤盤),需額外穿戴無菌工作服與鞋套,防止人員自身攜帶的微生物污染采樣表面。?
- 環境控制:采樣環境需避免強光直射(如陽光、紫外線燈)—— 強光會分解 ATP,導致 RLU 值偏低;同時禁止在通風口下方采樣(避免氣流帶走表面的微生物或 ATP 殘留),環境溫度需控制在 15℃-30℃(超出該范圍會影響拭子中反應試劑的活性)。?
(二)器材準備?
- 拭子選擇:必須使用 3M 專用 ATP 檢測拭子(如 3M Clean-Trace Surface Swab,貨號 ATP100),禁止使用非專用拭子 —— 專用拭子預裝有裂解液與熒光素酶試劑,且拭子頭材質為聚酯纖維(吸附 ATP 效率達 90% 以上,遠超普通棉拭子的 60%),可確保 ATP 充分捕獲與反應。?
- 儀器與耗材檢查:確認 LM1 檢測儀已完成預熱(開機后需預熱 5 分鐘,屏幕顯示 “READY”);檢查拭子包裝是否完好(無破損、漏氣),且在有效期內(拭子開封后需 30 分鐘內使用,避免試劑受潮失效);準備無菌生理鹽水(用于濕潤干燥表面,如不銹鋼設備表面)、無菌標簽(用于標記樣品信息)、采樣記錄單(記錄采樣時間、地點、表面類型)。?
二、拭子使用與樣品采集規范流程?
(一)拭子開封與活化?
- 無菌開封:用手捏住拭子包裝的 “撕口處”,沿水平方向緩慢撕開(禁止用剪刀剪開,避免剪刀污染拭子頭),取出拭子 —— 注意僅觸碰拭子桿的末端(非采樣端),禁止接觸拭子頭或桿體中部。?
- 干燥表面濕潤處理:若采樣表面為干燥狀態(如烤箱內壁、醫療設備臺面),需用無菌移液器吸取 0.5mL 無菌生理鹽水,滴在拭子頭處(確保拭子頭濕潤但不滴水);若為濕潤表面(如水槽內壁、餐具表面),可直接使用干燥拭子,無需額外濕潤(避免過多水分稀釋試劑)。?
(二)采樣操作(分表面類型)?
1. 平面采樣(如桌面、設備臺面)?
- 劃定采樣區域:用無菌記號筆在目標表面劃定 10cm×10cm 的正方形區域(若表面面積不足,可按實際面積采樣,需在記錄單注明),確保采樣區域無明顯污漬、劃痕(污漬會遮擋 ATP,導致漏檢)。?
- 擦拭手法:將拭子頭緊貼表面,以 “Z” 字形軌跡擦拭劃定區域 —— 橫向擦拭 5 次,縱向擦拭 5 次,擦拭力度以拭子頭輕微變形為宜(力度過輕無法充分接觸表面,過重易導致拭子頭脫落);擦拭過程中需確保拭子頭始終在劃定區域內,避免超出范圍導致樣品污染。?
2. 曲面 / 縫隙采樣(如管道接口、門把手)?
- 曲面采樣:對于圓柱形表面(如門把手),將拭子頭圍繞表面旋轉擦拭 3 圈,同時沿軸向移動拭子(移動距離約 5cm),確保拭子頭與曲面全方位接觸;對于不規則曲面(如管道接口),用拭子頭反復擦拭縫隙處(重點關注凹陷部位,此類區域易殘留 ATP)。?
- 縫隙采樣:若表面存在縫隙(寬度≤2mm,如設備接縫處),將拭子頭折疊成 “V” 形,插入縫隙中,緩慢往返擦拭 4 次,避免用力過猛導致拭子頭卡在縫隙中。?
(三)拭子處理與檢測準備?
- 試劑混合:采樣完成后,將拭子頭插回原包裝的試劑管中(確保拭子頭完全浸入試劑液中),用手捏住試劑管中部,上下顛倒 5 次(每次顛倒需停留 2 秒,使 ATP 與裂解液充分反應,釋放核酸),隨后靜置 1 分鐘(讓熒光素酶與 ATP 反應生成熒光)。?
- 樣品標記與記錄:在試劑管上粘貼無菌標簽,標注 “采樣日期 - 時間 - 地點 - 表面類型”(如 “20240520-0930 - 食品車間 - 烤盤”),同時在采樣記錄單上同步記錄,避免樣品混淆。?
三、質量控制與注意事項?
(一)空白對照與陽性對照?
- 空白對照:每批次采樣需設置 1 個空白對照 —— 取 1 支未采樣的專用拭子,按 “開封 - 活化 - 試劑混合” 流程處理后,放入 LM1 檢測儀檢測,RLU 值需≤10(若超過 10,說明拭子污染或操作環境存在干擾,需重新采樣)。?
- 陽性對照:每周需進行 1 次陽性對照驗證 —— 用已知 ATP 濃度的標準品(如 3M Clean-Trace Positive Control,RLU 值約 5000)涂抹在無菌表面,按正常流程采樣檢測,檢測結果需在標準品 RLU 值的 ±10% 范圍內(若偏差過大,需校準 LM1 檢測儀或更換拭子批次)。?
(二)常見操作誤區與規避?
- 避免交叉污染:每采集 1 個樣品需更換 1 副手套與 1 支拭子,禁止用同一拭子采樣多個表面;采樣工具(如記號筆、移液器)需定期用 75% 酒精消毒,避免工具攜帶的 ATP 污染采樣表面。?
- 拭子處理時限:采樣完成后需在 10 分鐘內將拭子放入 LM1 檢測儀檢測(ATP 在室溫下易降解,超過 10 分鐘 RLU 值會下降 15%-20%),禁止長時間放置。?
- 異常情況處理:若采樣過程中拭子頭脫落,需立即停止采樣,用無菌鑷子移除脫落的拭子頭,更換新拭子重新采樣,并在記錄單注明 “拭子脫落,重新采樣”;若檢測 RLU 值異常偏高(如遠超該表面常規值),需重復采樣 1 次,確認是否為偶發污染。?
四、拭子廢棄物處理?
采樣完成后的拭子(包括未使用但已開封的拭子)需放入醫療廢物專用垃圾袋(黃色),按《醫療廢物管理條例》進行無害化處理(禁止與生活垃圾混放);試劑管中的殘留液體含熒光素酶等生物試劑,需密封后再丟棄,避免試劑泄漏污染環境。?
通過嚴格遵循本手冊的樣品采集與拭子使用規范,可確保美國 3M ATP 熒光檢測儀 LM1 的檢測結果真實、可靠,為食品衛生、醫療潔凈度管控提供精準的數據支撐。